QB_T 5712-2022__发酵液中L-乳酸的测定酶电极法

上传人：资料之王

文档编号：7064951

上传时间：2022-01-04

格式：PDF

页数：5

大小：235.53KB

《QB_T 5712-2022__发酵液中L-乳酸的测定酶电极法》由会员分享，可在线阅读，更多相关《QB_T 5712-2022__发酵液中L-乳酸的测定酶电极法（5页珍藏版）》请在维思文库上搜索。

1、ICS67.180.20 CCS X69 QB 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T XXXXXXXXX 发酵液中 L-乳酸的测定酶电极法 Determination of L-lactate in fermentation enzyme-Electrode method （报批稿） XXXX - XX - XX 发布XXXX - XX - XX 实施中华人民共和国工业和信息化部发布 QB/T XXXXXXXXX I 前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由中国轻工业联合会提出。本文件由全

2、国食品工业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口。本文件起草单位：河南金丹乳酸科技股份有限公司、山东省科学院生物研究所、山东寿光巨能金玉米开发有限公司、梁山菱花生物科技有限公司、武汉远大弘元股份有限公司、山东百盛生物科技有限公司、中国生物发酵产业协会、天津科技大学。本文件主要起草人：蒋栋梁、史建国、冯志合、高世军、郭脉海、张文文、高太民、张成林、李建军、毕春元、王晋。本文件为首次发布。 QB/T XXXXXXXXX 1 发酵液中 L-乳酸的测定酶电极法 1范围本文件规定了酶电极法测定发酵液中L-乳酸的原理、试剂和溶液、仪器和设备、试样制备和分析步骤。本文件适用于L-乳酸

3、发酵生产过程中L-乳酸的快速测定。本文件的定量限为0.01g/L。 2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理乳酸氧化酶可特异性催化L-乳酸，生成相应的氧化产物和过氧化氢（H2O2）。测定时，样品中L- 乳酸向酶膜扩散，并与乳酸氧化酶层接触发生酶催化反应，催化产物H2O2在电极表面产生电流信号的变化，电流信号变化量与样

4、品中L-乳酸的浓度在一定范围内成线性相关性。将乳酸酶电极与相应的液体试剂、电路、控制软件等组成仪器，从而实现L-乳酸的快速、准确测定。 22 3 22 363OHCOCOOHCHOOHOHC-L 乳酸氧化酶 222 HOHOH 5试剂和溶液本试验方法中，所用试剂除特殊注明外均为分析纯；用水应符合GB/T 6682中三级(含三级）以上的水规格。试剂 5.1.1磷酸二氢钠：相对分子质量 119.98。 5.1.2磷酸氢二钠：相对分子质量 141.96。试剂配制 5.2.1缓冲溶液:用分析天平分别称取过 20 目分析筛的磷酸氢二钠 0.85g，过 20 目分析筛的磷酸二氢钠 0.19g，

5、溶于 100mL 水中，备用。标准品 5.3.1L-乳酸锂：纯度97%。 QB/T XXXXXXXXX 2 标准溶液配制 5.4.1L-乳酸标准溶液：将乳酸锂放入烘干箱，104烘干 4h，取出放干燥器冷却至室温，用电子天平准确称取 0.0550g 烘干后乳酸锂放入 100mL 烧杯中，加入少量蒸馏水使之溶解，转移至 100mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。密封保存。 L-乳酸氧化酶酶膜乳酸氧化酶 0.1U（活力单位）；04保存。 6仪器和设备实验室常用和下列仪器适用于本文件。分子筛:20 目烘干箱分析天平:感量为 0.01g 电子天平：感量为 0.0001g 酶电极乳酸

6、分析仪：直接读数式，测量相对误差2%。 7试液制备用干燥洁净容器取待测溶液 1mL 左右，转移至 1.5mL 离心管内，待测。当待测溶液中 L-乳酸含量0.50 g/L，应按相应比例对待测液进行稀释后再测定。 8分析步骤校正仪器 8.1.1室温下开机，启动仪器，首先用 L-乳酸标准溶液（5.4.1）、缓冲溶液（5.2.1）进行仪器校正（手工校正，全自动仪器自动校正），使仪器达到可测样状态。 8.1.2当酶电极响应信号小于 200 时，应更换新酶膜。测定样品 8.2.1半自动仪器用试液（7）冲洗微量进样器，至少两次。准确吸取试液（7） 25L，用滤纸擦干针尖外部后注入进样口。仪器显示测定结束后读取显示值。 8.2.2全自动仪器按仪器本身操作程序进行测定。分析结果的表述样品中L-乳酸的含量以g/L表示，按公式（1）计算： nRX.(1) 式中： X样品中L-乳酸的含量，单位为克每升（g/L）； R仪