黑豆皮花青素对肝癌细胞的作用及分子机理研究

《黑豆皮花青素对肝癌细胞的作用及分子机理研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《黑豆皮花青素对肝癌细胞的作用及分子机理研究（64页珍藏版）》请在维思文库上搜索。

1、2018 届 硕 士 学 位 论 文届 硕 士 学 位 论 文 黑豆皮花青素对肝癌细胞的作用黑豆皮花青素对肝癌细胞的作用 及分子机理研究及分子机理研究 作者姓名白金晶 指导教师李玉英副教授 学科专业生物化学与分子生物学 研究方向蛋白质化学与工程 培养单位生物技术研究所 学习年限2015 年 9 月至 2018 年 6 月 二一八年六月 山西大学 2018 届硕士学位论文 黑豆皮花青素对肝癌细胞的作用黑豆皮花青素对肝癌细胞的作用 及分子机理研究及分子机理研究 作者姓名白金晶 指导教师李玉英副教授 学科专业生物化学与分子生物学 研究方向蛋白质化学与工程 培养单位生物技术研究所 学习年限2015 年

2、 9 月至 2018 年 6 月 二一八年六月 Thesis for Masters degree, Shanmechxi University, 20108 Study on the Effect and Molecular Mechanism of Anthocyanins from Black Soybean Coats in Hepatoma Cells Student NameJin-jing Bai SupervisorVice Prof. Yu-ying Li MajorBiochemistry and Molecular Biology SpecialtyProtein Che

3、mistry and Engineering DepartmentInstitute of Biotechnology Research Duration2015.09-2018.06 June, 2018 目录 中文摘要.I Abstract.III 第一章 文献综述.1 1.1 花青素概述.1 1.1.1 花青素的种类及结构.1 1.1.2 花青素的生物学功能.1 1.2 JAK2/STAT3 信号通路研究进展. 2 1.2.1 JAK2/STAT3 信号通路概述. 2 1.2.2 JAK2/STAT3 信号通路与细胞凋亡. 3 1.3 研究目的与意义.5 第二章 BSCA 成分鉴定与抗氧

4、化活性研究.7 2.1 引言.7 2.2 材料、试剂与仪器.7 2.3 方法.8 2.3.1 高效液相色谱法分析鉴定.8 2.3.2 细胞培养.8 2.3.3 MTT 检测.9 2.3.4 抗氧化酶及 MDA 的检测.9 2.3.5 活性氧的检测.9 2.3.6 统计学分析.9 2.4 结果与分析.10 2.4.1 BSCA 成分分析与鉴定.10 2.4.2 BSCA 对细胞的增殖抑制作用.10 2.4.3 BSCA 可改变细胞内抗氧化酶系统.12 2.4.4 BSCA 引起细胞内 ROS 降低.13 2.4.5 讨论.14 第三章 BSCA 诱导肝癌细胞发生凋亡.17 3.1 引言.17 3

5、.2 材料、试剂与仪器.17 3.3 方法.17 3.3.1 细胞培养.17 3.3.2 MTT 及 EDU 细胞增殖检测. 17 3.3.3 细胞形态学观察.18 3.3.4 细胞核变化情况的检测.18 3.3.5 流式细胞术检测细胞凋亡.18 3.3.6 线粒体膜电位的检测.19 3.3.7 统计学分析.19 3.4 结果与分析.19 3.4.1 BSCA 可抑制肿瘤细胞的增殖.19 3.4.2 BSCA 可引起癌细胞的形态变化.21 3.4.3 BSCA 可引起癌细胞的细胞核变化.22 3.4.4 BSCA 可诱导肝癌细胞发生凋亡.22 3.4.5 BSCA 降低线粒体膜电位.23 3.

6、4.6 讨论.25 第四章 BSCA 对 JAK2/STAT3 信号通路的影响.27 4.1 引言.27 4.2 材料、试剂与仪器.27 4.3 方法.27 4.3.1 细胞培养.27 4.3.2 Western blot 检测凋亡相关蛋白的表达水平.27 4.3.3 细胞总 RNA 的提取及 cDNA 的合成.29 4.3.4 qRT-PCR 检测细胞 JAK2/STAT3 基因的表达.29 4.3.5 shRNA 干扰.30 4.3.6 统计学分析.30 4.4 结果与分析.30 4.4.1 BSCA 对肝癌细胞中凋亡相关蛋白的影响.30 4.4.2 BSCA 对肝癌细胞中 JAK2/ST

7、AT3 蛋白的影响.31 4.4.3 shJAK2 下调 JAK2/STAT3 的表达. 32 4.4.4 讨论.34 小结与展望.35 参考文献.37 攻读学位期间取得的研究成果.46 致谢.47 个人简况及联系方式.48 承诺书.49 学位论文使用授权声明.50 Contents ChineseAbstract. I Abstract.III Chapter 1 Review. 1 1.1Anthocyanins overview.1 1.1.1 The types and structures of anthocyanins.1 1.1.2 The biological function

8、 of anthocyanins.1 1.2Advanced in JAK2/STAT3 signaling pathway research.2 1.2.1 overview of JAK2/STAT3 signaling pathway.2 1.2.2 JAK2/STAT3 signaling pathway and cell apoptosis. 3 1.3 Research objective and significance.5 Chapter 2 The component of BSCAand its research on antioxidant properties. 7 2

9、.1 Introduction.7 2.2 Materials, reagents and instruments.7 2.3 Methods.8 2.3.1 HPLC analysis and identification.8 2.3.2 Cell culture.8 2.3.3 MTT assay.9 2.3.4 The detection of antioxidant enzyme and MDA. 9 2.3.5 The detection of ROS.9 2.3.6 Statistical analysis. 9 2.4 Results and analysis.10 2.4.1

10、The component analysis and identification of BSCA. 10 2.4.2 BSCAinhibited cell proliferation.10 2.4.3 BSCAcould enhance intracellular antioxidant system. 12 2.4.4 BSCAdecreased ROS level.13 2.4.5 Discussions.14 Chapter 3 BSCAinduced cell apoptosis in hepatoma cells.17 3.1 Introduction.17 3.2 Materia

11、ls, reagents and instruments.17 3.3 Methods.17 3.3.1 Cell culture.17 3.3.2 MTT and EDU assays. 17 3.3.3 Cell morphology observation.18 3.3.4 The detection of the change in the nucleus. 18 3.3.5 Flow cytometry detected cell apoptosis. 18 3.3.6 The detection of mitochondrial membrane potential.19 3.3.

12、7 Statistical analysis. 19 3.4 Results and analysis.19 3.4.1 BSCAcould inhibit cell proliferation.19 3.4.2 BSCAcould cause the changes of cell morphology.21 3.4.3 BSCAcould cause the change in the nucleus.22 3.4.4 BSCAcould induce cell apoptosis in hepatoma cells. 22 3.4.5 BSCAdecreased mitochondria

13、l membrane potential.23 3.4.6 Discussions.25 Chapter 4 The effects of BSCAon JAK2/STAT3 signaling pathway in Hep G2 cells.27 4.1 Introduction.27 4.2 Materials, reagents and instruments.27 4.3 Methods.27 4.3.1 Cell culture.27 4.3.2 Western blot detected the expression of apoptosis-related protein.27

14、4.3.3 RNAextraction and cDNAsynthesis in hepatoma cells.29 4.3.4 qRT-PCR detected the expression of JAK2/STAT3 genes.29 4.3.5 RNAi. 30 4.3.6 Statistical analysis. 30 4.4 Results and analysis.30 4.4.1 The effects of apoptosis-related protein in hepatoma cells. 30 4.4.2 The effects of JAK2/STAT3 protein in hepatoma cells.31 4.4.3 shJAK2 reduced the expression of JAK2.32 4.4.4 Discussions.34 Summary and Outlook.35 References. 37 Reasearch achievements. 46 Acknowledgements.47 Personal profiles. 48 Letter of commitment.49 Authorization and Statement.50 I 中文摘要 在我国肝癌是一种高致死率的恶性疾病，它的预防