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Ⅰ型干扰素系统在多发性肌炎皮肌炎患者和炎性肌病大鼠模型中的表达

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干扰素 系统 多发性 皮肌炎 患者 炎性肌病 大鼠 模型 中的 表达
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博士学位论文 学校代码: 1 0 0 2 3 学号: b 2 0 0 7 4 5 6 I 型干扰素系统在多发性肌炎皮肌炎患者和炎性肌病 大鼠模型中的表达 所院 : 姓名 : 指导教师: 学科专业: 研究方向: 完成日期: 中日友好医院 祖宁 王国春 内科学 炎性肌病 2 0 11 年4 月 ,0Ijl:,。00。l;; 独创性声明 I I II II II I I II I II lUI II Y 19 8 5 9 7 0 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人已经发表或撰写过的研究 成果,也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同 志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名:谚刍 签字日期:山,,年f 月如日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解j 量塞迹塑医堂瞳有关保存、使用学位论文的管理办 法。有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借 阅。本人授权j 匕塞迹塑医堂瞳可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行 检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名: 幻 、l 导师签名: 签字日期:勘,,年f 月锄日 签字日期:纱,年歹月矽日 学位论文作者毕业后去向: 工作单位: 通讯地址: 电话: 邮编: 目录 中文摘要一 l 英文摘要。 3 论文正文 第一部分多发性肌炎皮肌炎患者干扰素表达及与临床相关性研究 前言 5 材料与方法一 6 结果 1 4 讨论 1 9 结论 2 l 参考文献 2 2 第二部分I 型干扰素系统在自身免疫性炎性肌病大鼠模型肌肉及肺脏组织的表达 前言2 3 日l J吾厶, 材料与方法 2 4 结果 3 0 讨论 3 9 结论 4 0 参考文献 3 8 文献综述 4 1 缩略词表 5 9 个人简历 6 0 致谢 6 1 北京协和医学院中国医学科学院临床博士研究生学位论文 中文摘要 特发性炎性肌病( i d i o p a t h i ci n f l a m m a t o r ym y o p a t h i e s ,I I M ) 是一组以慢性肌肉 炎症反应导致进行性肌萎缩为特点的系统性自身免疫病,主要包括多发性肌炎 ( p o l y m y o s i t i s ,P M ) 和皮肌炎( d e r m a t o m y o s i t i s ,D M ) 。由于病因和病理机制不明, P M D M 的临床治疗仍以激素和免疫抑制剂为主,缺乏特异性,临床上出现大量的 药物毒副作用。只有通过寻找P M D M 的发病机理,明确疾病发生、发展关键的免 疫调节通路,才能从中找到P M D M 特异性诊断和病情活动性指标以及药物治疗的 靶点,为临床治愈P M D M 铺平道路。尽管确切的发病机制尚不清楚,但P M D M 被认为是环境因素、遗传因素、感染和淋巴细胞紊乱等交互作用所致。近年来国外 基因芯片技术研究发现I 型干扰素( t y p eIi n t e r f e r o n ,I F N ) 诱导基因与P M D M 临床活 动性密切相关。基因芯片技术是一种能对致病基因进行大规模高通量同步性检测的 新技术,但只是初步的定性筛选手段,无法对基因及其蛋白的表达进行精确的定量 表达研究,为此还需要对大样本的P M D M 患者进行I 型I F N 系统蛋白和基因的检 测来验证。 本实验第一部分利用E L I S A 法检测P M D M 患者血清I F N a 、I F N f ) 、I F N 7 。实 时定量P C R 法检测患者肌肉组织I F N a 、I F N J 3 、干扰素a 受体l ( I F N a R l ) 、信号 传导蛋白和转录激活物( s i g n a lt r a n s d u c e ra n da c t i v a t o ro ft r a n s c r i p t i o n l ,S T A T l ) 的 m R N A 表达水平,免疫组化技术检测B D C A 一4 在患者肌肉组织中的表达。结果发现 P M D M 患者外周血I F N a 、I F N I B 蛋白表达明显高于正常对照组( 尸均< O 0 5 ) ;D M 组明显高于P M 组( P 均< 0 0 5 ) 。血清I F N a 和I F NJ 3 水平在伴皮疹的患者组中明显 升高( P 均< O 0 5 ) ;与E S R 、C R P 水平呈明显正相关( 尸均< 0 0 1 ) 。1 2 例患者经治 疗后I F N a 、I F N ) 水平明显下降( P 均< O 0 1 ) 。P M D M 患者组肌肉的I F N a 、I F NJ 3 、 S T A T l 基因表达明显高于正常对照组( 尸均< O 0 5 ) 。浆树突细胞( p l a s m a c y t o i d d e n d r i t i cc e l l ,P D C ) 是I 型I F N 主要的分泌细胞,其细胞表面特异性表达B D C A - 4 , 研究发现在患者肌纤维周炎性细胞中B D C A 一4 表达阳性。 近年来发现间质性肺病( i n t e r s t i t i a ll u n gd i s e a s e ,I L D ) 合并感染是P M D M 的主 要死亡原因之一,严重影响该病的预后。由于取材困难,大大影响了对P M D M 患 者肺脏受累发病机制的研究。我们实验室在2 0 0 5 年成功建立了自身免疫性炎性肌 病( e x p e r i m e n t a la u t o i m m u n em y o s i t i s ,E A M ) 的动物模型,发现部分模型肺脏组织同 时受累,表现为不同程度的间质性肺泡炎。第二部分实验通过建立了E A M 大鼠模 型,结果发现E A M 大鼠模型组的血清C K 、I F N o t 、I F N l 3 明显高于对照组俨值均 < 0 0 5 ) ;模型组的肌肉和肺脏组织出现不同程度的病变,其病理评分与对照组比较 明显升高俨均< 0 0 5 ) ;模型组肌肉中的I F N c t 、I F N l 3 、I F N c 【R 1 、S T A T I 、M x A 、I F I T l 、 I S G l 5 m R N A 表达水高于对照组( P 均< O 0 5 ) ,与血清C K 值呈正相关( P 均< O 0 5 ) , 北京协和医学院中国医学科学院临床博士研究生学位论文 与肌肉病理评分呈正相关( 尸均< 0 0 5 ) ;模型组肺脏中的I F N c t 、I F N l 3 、I F N o t R l 、 S T A T l 、M X l m R N A 表达水平高于对照组,并与肺脏病理评分呈正相关俨均< O 0 5 ) 。 在模型组的受累肌肉和肺脏均有B D C A 4 表达,而对照组表达阴性。 本研究证实P M D M 患者和E A M 大鼠模型外周血清I F N a ,I F N p 蛋白水平表达 明显升高,P M D M 患者和E A M 大鼠模型的受累靶器官中I 型I F N 和或其诱导基 因表达升高,且与病情活动度有一定的关系。表明I 型I F N 系统可能参与了P M D M 和E A M 大鼠模型靶器官的病理损害,P D C 在P M D M 患者肌肉和E A M 大鼠模型 肌肉和肺脏中表达阳性,进一步证实了以上结论。抑制I 型I F N 系统为治疗P M D M 提供了新的治疗思路。 【关键词】多发性肌炎;皮肌炎;干扰素类;组织病理;实时定量P C R 北京协和医学院中国医学科学院临床博士研究生学位论文 T h ee x p r e s s i o no ft y p eIi n t e r f e r o ns y s t e mi ni d i o p a t h i ci n f l a m m a t o r y m y o p a t h i e s A b s t r a c t I d i o p a t h i ci n f l a m m a t o r ym y o p a t h y ( I I M ) i sah e t e r o g e n e o u sg r o u po fs y s t e m i c o n n e c t i v et i s s u ed i s e a s e st h a ts h a r ec h r o n i cm u s c l ei n f l a m m a t i o no fu n k n o w nc a u s e , i n c l u d i n gp o l y m y o s i t i s ( P M ) ,d e r m a t o m y o s i t i s ( D M ) a n di n c l u s i o nb o d ym y o s i t i s ( I B M ) B e c a u s eo fu n k n o w np a t h o g e n e s i s ,n o wt h eo v e r w h e l m i n gt r e a t m e n t s f o r P M D Ms t i l li n c l u d eg l u c o s t e r o i d sa n di m m u n o s u p p r e s s a n t s ,w h i c hd on o ts p e c i f i c a l l y t r e a tt h i ss y n d r o m ea n du s u a l l yp r o d u c em a n yt o x i cs i d ee f f e c t s P M D Mh a sb e e na d i l e m m ai nt h ed i a g n o s i sa n dt r e a t m e n ta r o u n dt h ew o r l d T h e r e f o r e ,l o o k i n gf o rt h ek e y i m m u n er e g u l a t o r yp a t h w a ya n dt h e ne l u c i d a t i n gt h ee v e n t u a lp a t h o g e n e s i sm e c h a n i s m , w i l ll e a dt ot h ef i n d i n go fas p e c i f i cd r u gt r e a t m e n tt a r g e tf o rP M D M R e c e n t l y ,s e v e r a l s e t so fc o m p e l l i n gm i c r o a r r a yp r o f i l i n gd a t as u g g e s tt h a ti n t e r f e r o n - i n d u c i b l eg e n e sa r e s i g n i f i c a n t l yo v e r e x p r e s s e di np e r i p h e r a lb l o o dm o n o n u c l e a rc e l l so fP M D Mp a t i e n t s , a n dt h i s s u g g e s t s t h a ti n t e r f e r o n sa n dr e l a t e dm o l e c u l e si ni n t e r f e r o nt r a n s d u c t i o n p a t h w a ym a yb el a t e n td r u gt r e a t i n gt a r g e t sf o rP M D M G e n em i c r o a r r a yi so n l ya p r e l i m i n a r yq u a l i t a t i v em e t h o d ,a n d t h e r e f o r ec a n n o t p r e c i s e l yq u a n t i f yg e n e s S u b s e q u e n t l y , m i c r o a r r a yp r o f i l i n gd a t an e e dt ob ec o n f i r m e db ym R N Aq u a n t i t a t i v e r e a l t i m ep o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n ( Q R T - P C R ) a n dp r o t e i nd e t e c t i o ni nal a r g ec o h o r t o fP M D Mp a t i e n t s W eh a v ee x a m i n e ds e r u ml e v e l so fI F N o t ,I F N B ,I F N ya n da n t i - J o 一1a n t i b o d yw i t h E L I S A S Y B RG r e e nD y eb a s e dr e a l t i m eq u a n t i t a t i v eP C Rm e t h o dw a su s e dt o c o m p a r et h ee x p r e s s i o nl e v e l so fI F N a ,I F N l 3 ,I n t e r f e r o n0 【r e c e p t o r1 ( I F N a R1 ) ,s i g n a l t r a n s d u c e ra n da c t i v a t o ro ft r a n s c r i p t i o n1 ( S T A T1 ) i np a t i e n t sw i t hI I Ma n dc o n t r o l s B D C A - 4i ne a c hP M D Mp a t i e n t Sm u s c l ew a sd e t e c t e db yI m m u n o h i s t o c h e m i s t r y S e r u ml e v e l so fI F N aa n dI F N 3i nI I Mp a t i e n t sw e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h o s ei n n o r m a lc o n t r o l s ( a l lP < O 0 1 ) S e r u ml e v e l so fI F N aa n dI F N 3i nD M p a t i e n t sw e r e s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h o s ei nP Mp a t i e n t s ( a l lP < O 0 5 ) T h es e r u ml e v e l so fI F N a a n dI F N pc o r r e l a t e dw i t ht h ep r e s e n c eo fs k i nr a s h ( a l l 尸< 0 0 5 ) S e r u mc o n c e n t r a t i o no f I F N aa n dI F N l 3c o r r e l a t e dp o s i t i v e l yw i t hE S Ra n dC R P ( a l lP < O 0 5 ) r e s p e c t i v e l y T h e s e r u ml e v e l so fI F N aa n dI F N 3d e c r e a s e ds i g n i f i c a n t l ya f t e rt r e a t m e n ti n12P M D M p a t i e n t s ( a l lP < O 0 1 ) m R N Ae x p r e s s i o nl e v e l so fI F N a ,I F N l 3 ,I F N a R la n dS T A T li n p a t i e n t so fP M D Mw e r eh i g h e rt h a nt h o s eo b s e r v e di nn o r m a lc o n t r o l s ( a l lP < O 0 5 ) B D C A 一4h a sa l s ob e e nd e t e c t e di np a t i e n t s m u s c l ew i t hP M D M T h el u n gi sa ni m p o r t a n to r g a ni n v o l v e di n t h i ss y n d r o m ea n ds e r i o u s l ya f f e c t st h e 北京协和医学院中国医学科学院临床博 = 研究生学位论文 p r o g n o s i so f t h ed i s e a s e O u r l a b o r a t o r ys u c c e s s f u l l y e s t a b l i s h e d e x p e r i m e n t a l a u t o i m m u n em y o s i t i s ( E A M ) i nr a tm o d e l sa n df o u n dt h a tl u n gt i s s u eW a Si n v o l v e dw i t h d i f f e r e n td e g r e e so fi n t e r s t i t i a la l v e o l i t i si n2 0 0 5 T w e n t y f o u ra d u l tL e w i sr a t sw e r e r a n d o m l yd i v i d e di n t o3g r o u p s :n o r m a lc o n t r o l s ,m o d e lc o n t r o l sa n dam o d e lg r o u p S e r u n al e v e l so fI F N ua n dI F N pw g r ed e t e c t e dw i t hE L I S A T h ep a t h o l o g yo ft h em u s c l e a n dl u n gt i s s u eW a Se x a m i n e db yh e m a t o x y l i n e o s i ns t a i n i n g B D C A - 4i nm u s c l ea n d l u n gt i s s u eo b t a i n e df r o mt h eE A M m o d e lg r o u pW a sd e t e c t e db yI m m u n o h i s t o c h e m i s t r y T h ec o n c e n t r a t i o no ft y p eIi n t e r f e r o ns y s t e mm R N AW a sd e t e c t e db yQ R T - P C R W e f o u n dt h a tt h ec o n c e n t r a t i o n so fI F N a ,I F N l 3a n dC Ki nt h em o d e lg r o u pw e r e s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h a to fc o n t r o lg r o u p ( a l lP < 0 0 5 ) T h es c o r e so fm u s c l ea n d l u n gt i s s u ei nE A Mm o d e lw e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h a to fc o n t r o lg r o u p s ( a l lP < O 0 5 ) B D C A - 4W a sd e t e c t e di nm u s c l ea n dl u n gw i t hE A Mm o d e l T h ee x p r e s s i o n l e v e l so ft h et y p eII F Ns y s t e mi nm u s c l eo fE A Mm o d e lw e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a n t h a to fc o n t r o lg r o u p s ( a l l 尸< 0 0 5 ) T h ee x p r e s s i o nl e v e l so ft h et y p eII F Ns y s t e mi n m u s c l ew i t hE A Mm o d e lw e r ep o s i t i v e l yc o r r e l a t e dw i t hC Ka n dt h es c o r e so fm u s c l e ( a l lP < O 0 5 ) T h ee x p r e s s i o nl e v e l so fI F N 0 t ,I F N D ,I F N a R l ,S T A T la n dM X l i nl u n go f E A Mm o d e lw e r e s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a n t h a to fc o n t r o lg r o u p sa n dp o s i t i v e l y c o r r e l a t e dw i t ht h es c o r e so fl u n g ( a l l 尸< 0 0 5 ) I nc o n c l u s i o n ,t h et y p eII F Ns y s t e ms e e m st ob ei n v o l v e di nt h ed i s e a s em e c h a n i s m s i nb o t hP M D Ma n dE A Mm o d e la si n d i c a t e db yg e n ee x p r e s s i o np r o f i l i n go fm u s c l ea n d l u n gt i s s u ea n dp r o t e i ne x p r e s s i o ni np e r i p h e r a lb l o o d T h i si sf u r t h e rs u b s t a n t i a t e db yt h e p r e s e n c eo ft h em a j o rt y p eII F Np r o d u c i n gc e l l s ,t h eP D C s ,i nm u s c l ei nP M D Ma n di n t h em u s c l ea n dl u n gi nE A Mm o d e l D e c r e a s i n gt h ee x p r e s s i o no ft y p eII F Nm a y b e c o m ean o v e la p p r o a c hf o rP M D Mt r e a t m e n t K e y w o r d s :D e m a t o m y o s i t i s ;P o l y r n y o s i t i s ;I n t e r f e r o n s ;E A M :H i s t o p a t h o l o g y ; 4 北京协和医学院中国医学科学院临床博士研究生学位论文 论文正文 第一部分:多发性肌炎皮肌炎患者干扰素表达及与I 晦床相关性研究 1 _ J - 刖吾 特发性炎性肌病( i d i o p a t h i ci n f l a m m a t o r ym y o p a t h i e s ,I I M ) 是一组获得性、与自 身免疫有关的骨骼肌疾病,临床上最常见的类型是多发性肌炎( p o l y m y o s i t i s ,P M ) 、 皮肌炎( d e r m a t o m y o s i t i s ,D M ) 。1 9 7 5 年B o h a n 和P e t e r 首先提出了I I M 的诊断标准, 即对称性近端肌无力,肌酶谱升高,典型的肌电图改变及典型的肌活检改变。若有 典型的皮疹损害,则诊断为D M ,而P M 的诊断仍然比较困难,B & P 的诊断标准不 能把许多类似于P M 的肌病排除。目前国际上也没有统一的病情活动性指标。由于 病因和病理机制不明,目前I I M 的临床治疗以激素和免疫抑制剂为主,缺乏特异性, 临床上出现大量的药物毒副作用。近年来临床上出现治疗自身免疫病的生物制剂, 但因缺乏特异性作用通路,疗效不肯定,难以推广。I I M 已成为全球性诊断和治疗 的难题,只有通过寻找I I M 的发病机理,明确疾病发生、发展关键的免疫调节通路, 才能从中找到I I M 特异性诊断和病情活动性指标以及药物治疗的靶点,为临床治愈 I I M 铺平道路。尽管确切的发病机制尚不清楚,但I I M 被认为是环境因素、遗传因 素、感染和淋巴细胞紊乱等交互作用所致。已经证明H L A D R B l 0 3 0 1 及与它连锁 的等位基因D Q A l 0 5 0 1 是与P M D M 关联的主要遗传易感基因。此外非H L A 基因 在P M D M 的发病机制中也扮演了重要的角色。近年来,干扰素( i n t e r f e r o n ,I F N ) 家族及其免疫调节通路和其诱导的基因可能在P M D M 发病中具有重要作用。 I F N 分为I 型和I I 型,I 型I F N 包括I F N a 、I F N f ) 、I F N c o ,I I 型主要为I F N y 。I 型主要由单核细胞及成纤维细胞产生,介导和调节天然免疫,I I 型I F N 由激活的 C D 4 + 性T 细胞,C D 8 + T 细胞和N K 细胞产生,调节特异性免疫。最初发现干扰素 与自身免疫疾病的关系,是由于在临床上使用I F N 作为治疗用药并发自身免疫性疾 病。W i l s o n 等【4 】曾报道用I 型I F N 临床治疗时并发自身免疫病比率高达4 。1 9 。 此后,人们逐渐认识到干扰素与自身免疫性疾病病理机制之间有着密切的关系。文 献报道非自身免疫性疾病患者接受I F N a 治疗后出现D M 的症状,并发现I 型I F N 诱导基因在P M D M 患者的外周血和肌肉中均有显著性的表达。I 型I F N 与受体结 合后,其细胞内结构域与J a n u s 家族的蛋白J a k 激酶相连并使其活化,从而使S T A T l 、 S T A T 2 磷酸化,诱导I F N 靶基因转录。但至今国内对I F N 在P M D M 患者的血清学 研究及其信号传导途径尚存在空白。本部分研究通过对P M D M 患者外周血I F N 水 平及其与疾病的活动度、临床症状、自身抗体表达、肌肉病理特点等相关性进行分 析,以阐明I F N 与P M D M 发病的关联性;同时对部分患者的肌肉组织I F N 及其信 号传导系统进行研究,以探讨I F N 在P M D M 免疫病理机制中的作用。 北京协和医学院中国医学科学院临床博士研究生学位论文 材料与方法 一、主要试剂与仪器 1 主要试剂 人I F N a E L I S A 试剂盒( 美国R B 公司) 人I F N l 3 E L I S A 试剂盒( 美国R B 公司) 人I F N y E L I S A 试剂盒( 美国R B 公司) 人抗J o 1 抗体E L I S A 试剂盒( 德国欧蒙公司) T r i z o l ( 美国I n v i t r o g e n 公司) 高通量R N A t o e D N A 试剂盒( 美国A B I 公司) S Y B RG r e e nP C R 试剂盒( 美国A B I 公司) 琼脂糖S e a k e mL Ea g a r o s e ( P r o m e g a 公司) 兔抗大鼠B D C A 4 多克隆抗体( 美国A B C A M 公司) 二步法抗兔免疫组化检测试剂盒( 中国上海G e n eT e c h 公司) 引物由上海生工生物有限公司合成 2 主要仪器 冷冻离心机:e p p e n d o r f 公司c e n t i r f u g e5 8 1 0 R 常温离心机:e p p e n d o r f 公司c e n t i r f u g e5 4 1 5 D 实时定量P C R 仪:A B IP r i s m7 3 0 0 测序仪( 美国A B I 公司) 酶标仪:全自动多功能酶标仪( M U L T I S K A NM K 3 ,T h e r m o ,U S A ) 电热恒温培养箱:D H 4 0 0 0 A ,天津泰斯特 M I N Is h a k e r :M H l ,k y l i n - B e l lL a bI n s t r u m e n t sQ I L I N B E I E R 半自动洗板机:W e l l w a s h4M K2 ,T h e r m o ,U S A 石蜡切片机:日本樱花舒适切片机C R M 4 4 0 旋转式组织脱水机:T I S S U E T E KI I 组织包埋机:T i s s u e T e kT E C T M 通风橱:希玛1 8 0 0 1 0 0 0 2 3 5 0 凝胶成像系统( 美国,F O R M ) N a n o D r o p 核酸定量仪( 美国) 智能型热循环仪P T C 2 0 0 ( 德国,贺利氏) 二、标本来源及病例资料 7 9 例P M D M 患者均来自2 0 0 8 年1 月到2 0 1 0 年1 0 月北京中日友好医院风湿 免疫科住院部,其中男性1 9 例,女性6 0 例,年龄1 5 ,- - 8 3 岁。病例诊断均符合1 9 7 5 年B o h a n 和P e t e r ( B P ) 提出的诊断和分类标准标准1 3 l oP M l 6 例,D M 6 3 例;健康 对照组( N C 组) 6 2 例,为我院血库献血健康人群,其中男性2 8 名,女性3 4 名, 平均年龄2 1 - 一3 5 岁。我们收集到1 2 例P M D M 患者诊断明确后和治疗后的两份血 6 北京协和医学院中国医学科学院临床博上研究生学位论文 清,该1 2 例患者均经过糖皮质激素( 0 5 1 0 m g k g ) 、免疫抑制剂等治疗后( 2 6 月) ,病情有不同程度的好转。收集1 1 例患者P M D M 患者的肌肉活检标本,同时 选取性别、年龄相匹配的骨科手术( 外伤) 患者骨骼肌活检标本6 例作为对照,对 照组患者均除外P M D M 。研究组与对照组在性别、年龄构成上差异无统计学差异。 所有参与者都给予知情同意书并征得同意,本研究已通过北京中日友好医院论理委 员会的批准。患者和健康人每人采外周静脉枸橼酸钾抗凝血4 m l ,分离血清待测。 P M D M 患者组临床资料见表1 。1 2 例患者治疗前后临床资料对比见表2 。 表1P M D M 患者组临床资料 患者 性别 编号 年龄 诊断皮疹 ( 岁) 关节 炎 食道 病变 声音 嘶哑 间质 肺炎 E S R ( m m h ) C R P ( m g d 1 ) C K ( I U L ) P M D M D M D M D M D M P M D M D M D M D M D M D M D M D M D M P M D M D M D M P M D M D M 5 6 8 2 3 4 6 6 4 3 6 “2 4 3 2 4 2 9 1 4 3 4 2 8 7 6 6 l 1 7 5 3 7 3 5 l 2 7 1 5 3 7 6 9 3 6 7 O 5 l 5 4 3 5 4 4 4 7 l 3 8 0 1 1 0 9 3 8 0 1 0 9 2 0 8 O 8 6 3 9 7 2 0 9 4 9 9 5 7 3 1 8 9 4 7 l 7 0 8 3 7 7 2 1 2 0 5 3 2 3 8 6 1 9 7 1 5 4 7 2 7 8 7 3 1 0 8 1 0 0 6 7 4 9 8 4 8 7 3 4 0 1 2 5 9 5 1 4 2 2 5 6 3 0 l 2 0 9 7 2 3 2 9 0 2 6 1 7 9 4 9 7 6 0 9 4 5 6 6 7 有 无 无 有 有 无 有有 无 无 有 有 有 无 有 有 无 无 无 有 无 有 有 无 无 无 无 无 无 有 无 无 无 无 无 无 无 无 有 无 无 无 无 无 无 无 无 无 无 无 无 有 有 无 无 无 无 无 无 无 无 有 无 无 无 无 无 无 有 无有 有 无 有 无 无有 无 有 有 无无无 无 有 无 无 无无 无 有 有 无 有 有 有 有 有 无有 有有 有 有 有有 有 有 无 有有有 无 有 有 镐 剪 拍 舛 钉 们 M 舛 鹕 船 舶 拍 拍 钉 酊 钙 舛 舭 加 弘 铂 M M M M M M M M M M M M M M M M M M M F F F F , 2 3 4 5 6 7 8 9 m n 佗 B H :2 插 墙 侈 加 扒 勉 ” 北京协和医学院中国医学科学院临床博士研究生学位论文 1 7 2 6 5 4 4 7 6 7 3 5 2 4 5 5 1 5 3 8 6 3 2 6 4 6 2 4 2 8 5 l 2 9 4 7 5 2 4 7 1 9 6 4 4 7 6 7 5 5 2 9 5 5 1 8 4 8 6 l 8 3 3 8 4 1 2 9 4 2 5 3 4 6 3 5 4 6 3 6 2 3 2 3 5 6 8 l 1 1 0 3 4 1 5 3 4 2 9 4 8 3 4 1 3 4 7 6 l 6 3 4 0 5 0 1 8 2 3 5 6 6 4 3 6 2 9 1 3 2 4 2
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本文标题:Ⅰ型干扰素系统在多发性肌炎皮肌炎患者和炎性肌病大鼠模型中的表达
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